重组人白介素18的发酵、纯化及功能鉴定
安秀梅
杨莉莉
李慧
曹水
任秀宝
1.天津市"肿瘤防治"重点实验室,天津医科大学附属肿瘤医院研究所免疫室,3000602.天津市"肿瘤防治"重点实验室,天津医科大学附属肿瘤医院研究所免疫室,3000603.天津市"肿瘤防治"重点实验室,天津医科大学附属肿瘤医院研究所免疫室,3000604.天津市"肿瘤防治"重点实验室,天津医科大学附属肿瘤医院研究所免疫室,3000605.天津市"肿瘤防治"重点实验室,天津医科大学附属肿瘤医院研究所免疫室,300060
摘要：目的:利用构建的重组菌株Pichia pastoris X-33/hlL-18,在3.7L发酵罐中表达重组人自介素18(hIL-18),探讨其大规模发酵及纯化工艺.方法:复苏工程菌X-33/hIL-18于BMGY培养基,在其A600鲫达到6左右时转入发酵罐进行高密度发酵.发酵液经过滤浓缩柱、疏水层析和阴离子交换层析分离纯化.结果:工程菌在3.7 L发酵罐采用甲醇诱导补料批式发酵,在pH 6.0,溶氧值(DO)20%～30%,温度28℃,甲醇诱导48 h重组hIL-18的表达产量为202 mg/L,发酵液经纯化后纯度可达97%以上,并初步证明重组hIL-18能协同IL-2诱导PBMCs分泌IFN-γ和协同IL-2增强NK细胞的杀伤活性.结论:利用Pichia pastoris分泌型表达系统和建立的分离纯化方法,能获得大量较高纯度的重组hIL-18,为进一步研究其活性和功能奠定基础.
关键词：白细胞介素18毕赤酵母发酵培养基分离和提纯
资助基金：天津市科技创新专项资金项目(项目编号.06FZZDSF01500)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 559-561,后插4 )
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