pRNAT-U6.1/Neo系统在E2F-3基因RNA干扰载体构建中的应用
胡海龙1
吴长利1
孙岩1
张文岚2
韩瑞发1
1.天津市泌尿外科研究所,天津医科大学第二医院,3002112.吉林大学第一医院移植中心
摘要：目的:构建针对E2F-3基因的siRNA表达载体.方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F-3基因的寡核苷酸链,各64个碱基,退火、克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,重组构建RNAi质粒.通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果.结果:重组构建的pRNAT-U6.1/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致,插入序列无点突变位点.结论:载体的成功构建为进一步研究E2F-3基因在膀胱肿瘤中的作用奠定了基础,为进一步以其为靶点进行膀胱癌细胞系体外实验创造了条件.
关键词：RNA干扰遗传载体质粒RNA小分子干扰
资助基金：国家自然科学基金(30700834)天津市科技支撑计划重点项目(07ZCGYSF05200)天津市高等学校科技发展基金(20060122)天津市卫生局科技项目(05KYZ60)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 829-831,后插1 )
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