破骨细胞抑制性凝集素胞外段可抑制骨髓干细胞向破骨细胞分化
刘瑞1
戴晨琳2
郑纺1
郭善一1
王宝利1
邱明才2
1.天津医科大学内分泌研究所,3000702.天津医科大学总医院内分泌科
摘要：目的:在大肠杆菌中表达人破骨细胞抑制性凝集素(OCIL)胞外段重组蛋白,体外检测表达的重组蛋白活性.方法:通过修改OCIL胞外段编码的碱基序列和重组PCR方法得到连续DNA片段;将表达载体pMAL-c2x/hOCIL转化入BL21(DE3)plysS宿主菌,IPTG诱导表达.利用直链淀粉亲和层析柱分离纯化,Western blotting鉴定重组蛋白.体外培养小鼠股骨骨髓细胞,在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导骨髓细胞向破骨细胞分化的基础上,加入不同浓度的重组蛋白,观察其对破骨细胞样细胞生成的影响.结果:重组菌中确有融合蛋白MBP-hOCIL表达,其中目的蛋白占纯化液总蛋白的91.36%,纯化后重组融合蛋白产率为24.3 mg/L培养基;所制备的重组蛋白对小鼠骨髓破骨细胞样细胞的形成有抑制作用.结论:本研究通过基因工程的方法成功获得了hOCIL胞外段重组蛋白,此蛋白在体外可以明显抑制破骨细胞样细胞的形成.
关键词：破骨细胞外源凝集素类重组蛋白质类大肠杆菌巨噬细胞集落刺激因子核因子κB受体活化因子配体骨髓细胞小鼠
资助基金：天津市自然科学基金重点项目(07JCZDJC07500)天津市高等学校科技发展基金(20050230)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 689-692 )
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