重组真核质粒pERFP-C1-hTudor-SN-SN(1～4)的构建和表达
付晓1
朱梦瑜1
高星杰2
钱宝鑫1
王保亚1
赵虹1
葛林3
杨洁4
1.天津医科大学免疫教研室,3000702.天津医科大学基础医学研究中心,3000703.天津医科大学生化教研室,3000704.300070,天津医科大学基础医学研究中心;300070,天津医科大学生化教研室
摘要：目的:将人类Tudor-SN蛋白SN(1～4)基因片段分别定向连入pERFP-C1质粒,使Todor-SN蛋白SN各功能片段与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达.方法:以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切法将目的片段连接到pERFP-C1载体上,再将构建成功的pERFP-C1-Tu-dor-SN-SN(1～4)重组质粒转染入HeLa细胞内,在荧光显微镜下观察红色荧光蛋白的表达.结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜下观察到红色融合蛋白的表达.结论:重组pERFP-C1-hTu-dor-SN-SN(1～4)质粒构建及表达成功.
关键词：质粒遗传载体发光蛋白质类重组融合蛋白质类转染HeLa细胞人类Tudor-SN蛋白
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(863;2007AA02Z115)国家自然科学基金(30670441,30970562,30670802,30811130394,30911130165,30970582)国家国际科技合作专项基金(07JCZDJC07300)国家自然科学基金(90919032)高等学校博士学科点专项科研基金(20091202110001)天津市教委重点项目(2008ZD01)天津医科大学科学基金(2007ky03,2009xk09)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 97-100 )
英文信息