Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达鼠IL-2蛋白的研究
黄大林1
戴支凯1
王鑫2
李彬彬2
钟江2
1.桂林医学院微生物学与免疫学教研室,广西,5410042.复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系
摘要：目的:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达重组鼠白细胞介素(IL)-2蛋白.方法:用Flag标记鼠IL-2并加入真核细胞启动子CMV,构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定;将鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,将pFB-CMV-IL-2转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态菌中,筛选阳性克隆,获得重组杆状病毒载体Bacmid-pFB-CMV-IL-2,抽提质粒;用脂质体转染法将Bacmid-pFB-CMV-IL-2转染Sf9昆虫细胞包装病毒,收获重组杆状病毒,将构建病毒转导BHK细胞培养,用Western blot检测IL-2蛋白.结果:通过杆状病毒表达系统,在BHK细胞成功表达重组的鼠IL-2蛋白.结论:重组杆状病毒在真核细胞巾成功表达重组鼠IL-2蛋白.
关键词：白细胞介素2重组蛋白质类杆状病毒科遗传载体质粒聚合酶链反应小鼠近交系
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2007AA02Z125)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 145-148 )
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