新型树突状细胞疫苗的构建及功能的初步鉴定
霍佳
杨莉莉
魏枫
于津浦
李慧
任秀宝
1.天津医科大学附属肿瘤医院免疫室、天津市肿瘤防治重点实验室,3000602.天津医科大学附属肿瘤医院免疫室、天津市肿瘤防治重点实验室,3000603.天津医科大学附属肿瘤医院免疫室、天津市肿瘤防治重点实验室,3000604.天津医科大学附属肿瘤医院免疫室、天津市肿瘤防治重点实验室,3000605.天津医科大学附属肿瘤医院免疫室、天津市肿瘤防治重点实验室,3000606.天津医科大学附属肿瘤医院免疫室、天津市肿瘤防治重点实验室,300060
摘要：目的:构建可同时实现沉默细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激和肿瘤相关抗原负载的新型树突状细胞(DC)疫苗.方法:构建沉默SOCS1并共表达HMGB1及肿瘤相关抗原NY-ESO-1的质粒(p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1).体外诱导单核细胞分化为DC,将p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1转染入DC细胞.同时设立未转染组、shNC/GFP转染组和p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1转染组.PCR和Westernblot验证基因及蛋白表达后,酶联免疫吸附(ELISA)法检测DC细胞分泌的肿瘤坏子因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-12、IL-1及IL-6的变化.结果:经测序证实所构建质粒序列与预期序列一致,酶切和PCR验证质粒结构正确.成功将p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1转染入DC细胞,并在基因和蛋白水平验证NY-ESO-1的正确表达,HMGB1可在胞浆内表达.SOCS1 shRNA质粒shS可沉默SOCS1表达.p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1转染组DCTNF-α、IL-12、IL-1及IL-6分泌量较未转染组和shNC/GFP转染组升高(P<0.05).结论:成功构建可同时实现沉默SOCS1、HMGB1刺激和肿瘤相关抗原负载的新型DC疫苗.
关键词：细胞因子信号转导蛋白抑制因子HMGB1蛋白质树突细胞癌症疫苗质粒转染基因表达
资助基金：天津市自然科学基金资助项目(09JCZDJC20400)天津市卫生局科技基金资助项目(09KZS0)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 318-321 )
英文信息