Tudor-SN蛋白TSN结构域亚结构片段重组质粒的构建与表达
钱宝鑫1
高星杰2
朱梦瑜1
杨震霞1
宋娟1
段中潮1
邵洁1
杨洁2
1.300070,天津医科大学免疫教研室2.300070,天津医科大学基础医学研究中心
摘要：研究人类Tudor-SN蛋白TSN结构域4个亚片段的功能,构建重组质粒pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN (I-Ⅳ).方法:以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增出目的基因,将双酶切后带有粘性末端的目的片段和pEGFP-C2载体连接,从而构建重组质粒pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN(Ⅰ-Ⅳ).将构建成功的重组质粒用脂质体法转染HeLa细胞,并在荧光显微镜下观察融合蛋白的荧光表达情况,Western印迹检测融合蛋白的表达.结果:对重组质粒进行双酶切鉴定可见Tudor-SN-TSN(Ⅰ -Ⅳ)的cDNA片段；脂质体转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.Weskrn印迹后可在相应位置检测到融合蛋白pEC FP-C2-Tudo-SN-TSN(Ⅰ-Ⅳ).结论:真核pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN(Ⅰ～Ⅳ)重组质粒构建及表达成功.
关键词：DNA结合蛋白质类质粒基因表达转染重组融合蛋白质类人类Tudor-SN蛋白
资助基金：国家国际科技合作专项基金(07JCZDJC07300)国家自然科学基金(90919032)高等学校博士学科点专项科研基金(20091202110001)天津市教委重点项目(2008ZD01)天津医科大学科学基金(2007ky03,2009xk09)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 881-883 )
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