小鼠核结合因子a1基因启动子报告载体的构建及鉴定
郑纺1
崔壮2
王宝利1
王洪武1
1.300193,天津中医药大学中医学院2.300193,天津医科大学
摘要：目的:构建小鼠核结合因子a1 (Cbfa1)基因启动子萤光素酶报告载体,并检测其驱动报告基因的转录活性.方法:以小鼠基因组DNA为模板,巢式PCR扩增含有Cbfal基因启动子(-1 000～+200 bp)的序列.限制性内切酶MluI和XhoI酶切这段序列后定向克隆到不含启动子的PGL3-Basic报告基因载体上,重组质粒命名为pGL3-Cbfa1.pGL3-Cbfa1瞬时转染成骨细胞系MC3T3-E1,检测其能否在Cbfa1基因启动子的调控下表达报告基因并提高萤光素酶活性.结果:pGL3-Cbfa1经酶切鉴定和序列分析证实与设计完全一致.细胞瞬时转染结果表明Cbfa1启动子具有转录活性,pGL3-Cbfa1的萤光素酶水平约是pGL3-Basic的35倍.结论:小鼠Cbfa1启动子报告基因载体的成功构建,为进一步将其用于抗骨质疏松药物的筛选与评价奠定了实验基础.
关键词：基因报告萤光素酶类核心结合因子类转录启动子
资助基金：国家自然科学基金(81102543)高等学校博士学科点专项科研基金(20091210120003)天津市高等学校科技发展基金(20080219)天津市应用基础与前沿技术研究计划(11JCYBJC13400)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1133-1135 )
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