转染内皮祖细胞的脂质体与腺病毒载体的比较
孙宁
陈剑秋
孙晋津
李辰运
张晓宇
邢帅
1.300211,天津医科大学第二医院外科2.300211,天津医科大学第二医院外科3.300211,天津医科大学第二医院外科4.300211,天津医科大学第二医院外科5.300211,天津医科大学第二医院外科6.300211,天津医科大学第二医院外科
摘要:目的:比较脂质体和腺病毒作为肝细胞生长因子(HGF)基因转染内皮祖细胞载体的效力.方法:分离培养大鼠骨髓血管内皮祖细胞,并通过摄取DiL-acLDL、结合FITC-UEA-1及流式细胞术检测表面抗原CD133+进行鉴定.脂质体介导细胞转染,将细胞分为HGF质粒转染组(转染pIRES2-EGFP-HGF质粒)、空载质粒转染组(转染plRES2-EGFP质粒)和空白对照组.病毒介导细胞转染,细胞分HGF病毒转染组(pAdxsi-GFP-HGF重组腺病毒转染)、空载病毒转染组(导入pAdxsi-GFP腺病毒)和空白对照组.荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,ELISA法检测HGF的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖能力.结果:脂质体和腺病毒载体均可成功将绿色荧光蛋白标记的HGF基因转入内皮祖细胞,其中腺病毒转染效率更高,最高可达80%以上,其表达HGF水平以及细胞增殖能力都明显强于脂质体转染.空载病毒转染组细胞增殖与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05),而空载质粒转染组细胞增殖明显少于空白对照组(P<0.05).结论:腺病毒作为HGF基因转染内皮祖细胞的载体相对于脂质体载体具有更高效、低毒、高表达目的基因的优点.
关键词:内皮细胞肝细胞生长因子脂质体腺病毒科遗传载体大鼠Wistar内皮祖细胞
资助基金:天津市自然科学基金资助项目(08JCYBJC27600)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 46-49 )
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