ts-SV40LT抗原转基因干细胞增殖活性的温度调控机制分析
刘洪良1
刘晓智1
刘振林1
姜忠敏2
盛凤3
李罡1
1.300162,天津市第五中心医院神经外科2.300162,天津市第五中心医院病理科3.300162,天津市第五中心医院中医内科
摘要：目的:研究温度敏感性猿猴病毒40大T抗原(ts-SV40LT)转基因干细胞增殖活性的温度调控机制.方法:用含ts-SV40LT抗原的表达质粒转染脐带间充质干细胞(UCMSCs),将其分别置于33℃和37℃培养,细胞免疫荧光方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)活性,PCR-ELISA端粒酶检测法检测端粒酶活性及细胞周期,Western Blot法检测周期素(Cyclin)D1、CyclinE、周期素依赖性蛋白激酶(CDK)2、CDK4、CDK6、P16和P21的蛋白表达情况,免疫荧光方法检测巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果:细胞在33℃时培养24、48、72 h的PCNA阳性表达百分率均高于37℃时,差异有统计学意义(P＜0.01).转染tsSV40LT抗原基因后,细胞在33℃培养箱时的端粒酶活性和Plx值高于37℃时,差异有统计学意义(P＜0.01).33℃时的Cyclin D1、CyclinE、CDK2、CDK4、CDK6及Nestin表达量高于37℃时,P16、P21、NSE和GFAP的表达量低于37℃时,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:通过tsSV40LT抗原基因的有效转染可实现干细胞在不同温度环境下的增殖调控.
关键词：间质干细胞脐带细胞增殖转基因增殖细胞核抗原低温周期素依赖激酶抑制剂p16周期素依赖激酶抑制剂p21细胞周期蛋白质依赖激酶类磷酸丙酮酸水合酶神经胶质原纤维酸性蛋白质
资助基金：国家自然科学基金(30872668)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 247-250 )
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