食管癌细胞系中Nanog基因沉默对顺铂敏感性的影响
石磊芝1
杜亚明1
苏鹏2
刘长军3
王中彬1
1.121000,辽宁医学院附属第一医院2.辽宁省辽阳市中心医院胸外科3.辽宁省鞍山第二医院
摘要：目的:检测干细胞基因Nanog在食管癌细胞系TE-1中的表达及其对顺铂敏感性的影响.方法:通过细胞免疫荧光检测食管癌细胞系TE-1中Nanog蛋白的表达；应用Lipofectamine 2000将荧光染料标记的Nanog siRNA转染进细胞中,通过荧光显微镜观察转染效率,再通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测小干扰RNA (siRNA)的沉默效率；转染后24 h加入顺铂,继续孵育48 h后测得不同转染组的半数抑制浓度(IC50),后加入相同浓度的顺铂5 mg/L,48 h后测得不同转染组的生存率.结果:Nanog蛋白在食管癌细胞系TE-1中高表达,以核表达为主；Nanog siRNA细胞转染率为(67.57±16.90)％,沉默效率可高达85％以上；转染24 h后加入顺铂,继续孵育48 h后测得Nanog siRNA组的IC50较阴性对照组和空白组相比均降低,差异有统计学意义.加入相同浓度顺铂5 mg/L,48 h后测得Nanog siRNA组细胞生存率明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义.结论:Nanog在食管癌细胞系TE-1中高表达,降低Nanog的表达后能够提高食管癌细胞对顺铂的敏感性.
关键词：食管肿瘤癌细胞系肿瘤RNA小分子干扰顺铂抗药性逆转录聚合酶链反应印迹法蛋白质Nanog
资助基金：辽宁省科技计划(2011225015)辽宁医学院青年科技启动基金(Y2011Z001)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 312-315,417 )
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