变形链球菌pacA和gtfB-cat与ctxB嵌合表达质粒的构建及表达
张剑1
赵秀2
杨德琴3
顾瑜1
吴家媛1
刘建国1
1.563003,遵义医学院附属口腔医院2.沈阳医学院3.重庆医科大学附属口腔医院
摘要：目的:构建含变形链球菌表面蛋白A区编码基因(pacA)、葡糖基转移酶催化区编码基因(gtfB-cat)及霍乱毒素B亚单位编码基因(ctxB)的嵌合表达质粒并表达目的蛋白.方法:将目的基因pacA、gtfB-cat、ctxB克隆至原核克隆载体pET32-a(+)构建嵌合质粒pET-pacA-cat-ctxB,将其转入表达宿主菌E.coliBL21(DE3),并测量其表达情况.结果:构建的重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,证实目的基因均正确插入到载体pET-32a(+)中,插入的相位正确,未改变目的基因的阅读框架,经诱导后表达目的蛋白,分子质量大小与预期一致.结论:成功构建了嵌合质粒pET-pa-cA-cat-ctxB,且它们均在原核细胞内获得正确表达.
关键词：链球菌酿脓糖基转移酶类霍乱毒素膜蛋白质类质粒嵌合状态原核细胞
资助基金：国家自然科学基金(30160086)遵义医学院硕士启动基金(2006]2122;2005]033)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 533-536 )
英文信息