人nanog-delta48基因的克隆及其真核表达载体的构建
邓璐林
章诺贝
张吉翔
1.江西省分子医学重点实验室, 南昌大学第二附属医院消化内科,3300062.江西省分子医学重点实验室, 南昌大学第二附属医院消化内科,3300063.江西省分子医学重点实验室, 南昌大学第二附属医院消化内科,330006
摘要：目的:构建pcDNA5/FRT-nanog-delta48真核表达载体,检测其在肝癌SMMC-7721细胞中的表达.方法:通过RT-PCR的方法克隆nanog基因的选择性剪接变异体nanog-delta48全长编码序列,连接入pMD18-T载体,经鉴定正确后亚克隆入pcDNA5/FRT,构建pcDNA5/FRT-nanog-delta48真核表达载体,测序无误后经脂质体介导转染到SMMC-7721细胞中,通过RT-PCR初步鉴定其在SMMC-7721细胞中的表达,并通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染前后的细胞增殖活力.结果:成功克隆nanog-delta48基因全长编码区,测序证明pcDNA5/FRT-nanog-delta48重组真核表达载体构建成功,使其在SMMC-7721细胞中过表达,MTT检测nanog-delta48转染入SMMC-7721细胞后,增殖能力增强.结论:剪接变异体nanog-delta48基因可能具有与nanog基因类似的活性.
关键词：基因干细胞剪接体克隆分子基因表达转染人类
资助基金：国家自然科学基金(30360037)国家自然科学基金(30360032)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 912-915 )
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