OCIL shRNA表达载体的构建及其对成骨细胞RANKL/OPG基因表达的调节
王君
郑纺
王宝利
1.300070,天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室2.300070,天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室3.300070,天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室
摘要：目的:探讨成骨细胞中破骨细胞分化抑制因子(OCIL)基因敲减后护骨素(OPG)和核因子κB受体活化因子配基(RANKL)mRNA的表达水平及其对破骨细胞分化的影响.方法:构建OCIL特异性shRNA表达载体并转染至细胞,分为pRNAT-N1组、pRNAT-N2组、pRNAT-N3组和阴性对照转染组.考察与阴性对照转染组比较,各组对OCIL mRNA水平的抑制率.将对OCIL mRNA干扰效果最佳的shRNA表达载体(pRNAT-N1组)和对照载体pRNAT-U6.1/Neo/CTL(control组)分别瞬时转染UMR106细胞,考察2组RANKL和OPG表达水平.各转染组条件培养基干预骨髓细胞后,观察PBS+control shRNA(vehicle组)、PTH+control shRNA(PTH组)及PTH+ OCILshRNA(shRNA组)破骨细胞样细胞(OLC)数量.结果:(1)与阴性对照转染组比较,pRNAT-N1、pRNAT-N2、pRNAT-N3对OCIL mRNA水平抑制率分别为64％、28％和59％.(2)pRNAT-N1转染UMR106成骨细胞后,RANKL mRNA表达水平明显升高,而OPG mRNA表达水平明显降低,转染后24 h RANKL:OPG比值较control组升高5.1倍.(3)vehicle组、PTH组及shRNA组OLC数分别为(1.83±0.75)个/孔、(49.67±6.77)个/孔及(65.50±7.34)个/孔,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:RANKL/OPG系统参与了OCIL对破骨细胞分化的调节作用.
关键词：成骨细胞破骨细胞骨保护素核因子κB受体活化因子RNA信使基因表达
资助基金：国家自然科学基金(81071436)天津市自然科学基金重点项目(11JCZDJC16500)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1226-1229 )
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