拟胚体高密度培养促进小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化*
陈明1
毕琳琳2
赵芳1
王智泉1
干学东1
王扬淦1
1.武汉大学中南医院心内科 邮编4300712.南方医科大学神经生物学教研室
摘要： 目的探讨拟胚体（EBs）培养密度对小鼠胚胎干细胞（ESCs）心肌细胞分化的影响。方法小鼠ESCs经过悬滴培养后形成EBs后，以高、低密度（120、60个EBs/60 mm组织培养皿）贴壁培养，免疫荧光检测心肌特异性蛋白肌钙蛋白T(TnT)的表达。在不同时间点计算不同密度组搏动EBs百分比；RT-PCR检测Nkx2.5、GATA4、β-MHC及ANF基因表达水平；Western-blot检测TnT及p38表达水平。结果通过悬滴培养法形成的EBs能够出现自发性搏动并且有TnT表达。高密度培养组与低密度培养组相比具有更高的搏动EBs百分比，Nkx2.5、GATA4、β-MHC和ANF基因高表达水平，以及TnT蛋白高表达水平（P＜0.05）。高密度培养组的p38活性更高，使用p38特异性阻断剂SB203580能够降低高密度组搏动EBs百分比和TnT蛋白表达水平。结论 EBs贴壁培养密度是影响ESCs向心肌细胞分化的一个重要因素，EBs高密度培养相比于低密度培养能够获得更大程度的心肌分化，且该现象可能是由p38信号通路所介导。
关键词：胚胎干细胞细胞计数肌细胞心脏细胞分化肌钙蛋白Tp38丝裂原活化蛋白激酶类拟胚体
资助基金：国家自然科学基金(81200119)中央高校基本科研业务费专项(121007)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 782-785 )
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