细胞分裂周期蛋白2启动子报告基因载体的构建与鉴定
周辉
吴炜
赵明
1.南方医科大学病理生理学教研室 5105152.南方医科大学病理生理学教研室 5105153.南方医科大学病理生理学教研室 510515
摘要：目的：构建细胞分裂周期蛋白2（Cdc2）基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc2-promoter，并检测其转录活性。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的Cdc2启动子序列并设计两端引物，扩增人基因组DNA中的Cdc2启动子。用限制性内切酶SacⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGL3-Basic和Cdc2启动子后，将Cdc2基因启动子插入到pGL3-Basic报告基因载体上。重组质粒命名为pGL3-Cdc2-promoter。将其与内参质粒pRL-SV40瞬时共转染骨肉瘤细胞U2OS，检测双荧光素酶活性。结果成功构建Cdc2基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc2-promoter，质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时共转染pGL3-Cdc2-promoter/pRL-SV40组荧光素酶活性为1.5915±0.1998，高于转染pGL3-Basic/pRL-SV40组的荧光素酶活性值0.0499±0.0104。结论 pGL3-Cdc2-promot-er在骨髓瘤细胞U2OS细胞中能被转录激活，为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础。
关键词：细胞周期蛋白类基因cdc细胞周期蛋白质依赖激酶类转录启动子细胞周期萤光素酶类
分类号：R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81272095)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 101-104 )
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