人胰岛素原基因突变导致糖尿病机制的实验研究
张红艳
崔景秋
李宁
刘铭
冯凭
1.天津医科大学总医院代谢病科 3000522.天津医科大学总医院代谢病科 3000523.天津医科大学总医院代谢病科 3000524.天津医科大学总医院代谢病科 3000525.天津医科大学总医院代谢病科 300052
摘要：目的：构建几种与人类糖尿病相关的人突变型胰岛素原质粒，并在大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1）中进行表达。方法以野生型人胰岛素原质粒基因PCMS-EGFP/HWT为模板，设计并合成引物，利用定点突变技术，PCR生成PCMS-EGFP/H-C(B19)G、H-L(B11)P、H-R(S6)C、H-F(B25)L 4种单点突变质粒，对每个质粒进行序列测定验证定点突变成功，用脂质体2000将上述野生型、4种突变型质粒及空质粒分别转染INS-1细胞，放射免疫法检测各细胞培养液中人胰岛素水平。结果序列测定证实上述质粒定点突变成功, H-C(B19)G、H-L(B11)P、H-R(S6)C 3组突变细胞培养液中胰岛素水平低于野生型和H-F(B25)L组（P＜0.05），与空质粒组差异无统计学意义，且3组彼此间差异无统计学意义；H-F(B25)L组与野生型差异无统计学意义（P＞0.05）。结论成功构建并表达4种突变型人胰岛素原质粒，不同突变型胰岛素原可能通过不同机制导致糖尿病。
关键词：诱变定点质粒转染内质网应激永久性新生儿糖尿病胰岛素原错误折叠β细胞功能衰竭
分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)R349.64(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81070629)前沿技术研究计划(11JCZDJC18500)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 293-296 )
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