SYBR Green实时定量端粒重复序列扩增法检测端粒酶活性
麻文青1
连福治2
汪金泉3
杨磊4
1.石河子大学医学院 邮编8320002.杭州师范大学医学院3.石河子大学生命科学学院4.石河子大学医学院 邮编832000; 杭州师范大学医学院
摘要:目的:采用实时定量端粒重复序列扩增法(RQ-TRAP法)检测不同细胞端粒酶活性。方法用RQ-TRAP和TRAP-ELISA两种方法同时检测12种细胞的端粒酶活性,并比较两种方法的检测结果。结果 RQ-TRAP方法能准确特异地检测系列稀释的293T细胞蛋白提取液的端粒酶活性,灵敏度可达8个细胞,扩增效率为98.92%。阴性对照组则未检测到端粒酶活性。RQ-TRAP方法测得12个细胞系中端粒酶的活性与TRAP-ELISA方法结果有较强相关性(r2=0.7625)。两种方法检测肿瘤细胞端粒酶活性均高于正常细胞。结论 RQ-TRAP方法检测端粒酶可行,比TRAP-ELISA方法成本低、时间短,且支持高通量,是一种新的可快速可靠定量端粒酶活性的方法。
关键词:端粒基因扩增酶联免疫吸附测定端粒酶活性端粒重复序列扩增TRAP-ELISA
分类号:R34(基础医学)
资助基金:国家重大科学研究计划(2012CB911200)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 746-748 )
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