基于慢病毒载体系统构建重组JSRV-NM假病毒
龚淑敏1
李光明2
吴志敏2
董莉真2
程彬2
张斌2
朱泽2
1.天津市第四医院 邮编3002222.天津医科大学基础医学院病原生物学教研室
摘要：目的：采用慢病毒质粒结构重组JSRV-NM假病毒，克服JSRV-NM病毒只能通过绵羊支气管穿刺接种扩增，不能通过体外细胞培养扩增的问题。方法采用慢病毒高效包装系统pMD.G、pCMV-HIV△8.2和pHIV-eGFP，以JSRV-NM病毒的env包膜质粒pCMVJSRV-NM替代VSV-G病毒的包膜质粒pMD.G，转染293T细胞，复制、包装并产出重组的JSRV-NM假病毒。用real-time PCR检测WPRE表达来测定假病毒的滴度，用接种24孔板的293T细胞检测假病毒感染力。结果成功重组了基于慢病毒质粒结构的JSRV-NM假病毒，可超速离心浓缩成高滴度（1×108 TU/mL）的病毒，Lv-JSRV-NM包膜与Lv-VSV-G包膜按感染复数（MOI）=3的比例感染Hela细胞具有相同的感染能力。结论基于慢病毒质粒构建的JSRV-NM假病毒，能够在293T细胞中复制和扩增，产出的假病毒具有稳定性、感染力和安全性，符合二级生物实验室安全的要求。
关键词：JSRV-NM病毒假病毒慢病毒载体env基因病毒包装
分类号：Q939.47(微生物分类学（系统微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30772483)天津市自然科学基金重点项目(08JCZDJC23400)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 749-751 )
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