Notch1（NICD）过表达真核载体构建及对大鼠BMSCs增殖分化的影响
杜红阳1
李东宁1
付海燕2
包翠芬3
秦书俭3
1.辽宁医学院附属第一医院皮肤科 1210012.辽宁医学院附属第一医院 重症医学科 1210013.辽宁医学院解剖学教研室 121001
摘要：目的：探讨过表达Notch1(NICD)基因对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖分化的影响。方法构建Notch1(NICD)过表达真核载体，实验分正常对照组（CON组，不做转染）、阳性对照组（空载体组，将质粒pEGFP-N1转染BMSCs）和转染组（将重组质粒pEGFP-N1-NICD转染BMSCs）。转染48 h后观察细胞一般状态，Real-time PCR和Western blotting检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和Notch1基因和蛋白表达，流式检测转染后细胞凋亡、细胞周期，MTT检测细胞增殖情况。结果重组质粒pEGFP-N1-NICD编码序列与设计完全一致。转染组和空载体组BMSCs均可表达绿色荧光。转染组GFAP、Notch1的基因和蛋白表达均高于CON组和空载体组（均P＜0.05），空载体组与CON组差异无统计学意义；各组间NSE的基因和蛋白表达差异无统计学意义。转染组存活细胞比率低于CON组和空载体组，早期细胞凋亡比率、晚期细胞凋亡比率均高于CON组和空载体组；空载体组晚期细胞凋亡比率高于CON组。转染组细胞处于G1/G0期的比例高于CON组和空载体组，处于S期和G2/M期的比例低于CON组和空载体组（均P＜0.05）。除转染1 d时各组MTT A490值差异无统计学意义外，其余时点转染组MTT A490值均低于CON组和空载体组（均P＜0.05）。结论高表达Notch1(NICD)基因可能在一定程度上诱导BMSCs凋亡、抑制其增殖，且表现诱导向神经胶质样细胞分化。
关键词：细胞增殖细胞分化转染神经胶质原纤维酸性蛋白质磷酸丙酮酸水合酶Notch信号通路骨髓间充质干细胞诱导Notch1(NICD)
分类号：R349.5(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(31170930)辽宁省科技厅自然科学研究项目(2013022059)辽宁医学院青年科技启动基金(Y2011Z010)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 883-888 )
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