肿瘤干细胞来源的DC-CIK对同源肿瘤细胞的杀伤作用

庞冲; 张腾月; 王长利

doi:10.3969/j.issn.0253-9896.2014.10.004

摘要：目的：观察干细胞负载树突细胞诱导的杀伤细胞（CSC-DC-CIK）作为效应细胞对同源肿瘤细胞的杀伤作用，探讨CSC抗原参与肿瘤杀伤作用的可行性。方法培养肾癌细胞株A498和肺癌细胞株A549，用流式分选术分离纯化CD133+细胞，分别作为肾癌干细胞（KSC）和肺癌干细胞（LSC），冻融法制备抗原。提取健康产妇脐带血的单个核细胞，体外扩增诱导生成DC和CIK细胞。分别用上述CSC抗原负载DC，与CIK共培养（CSC-DC-CIK），流式细胞术分析DC和CIK细胞免疫表型，ELISA法检测细胞因子分泌水平，用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测CSC-DC-CIK对同源肿瘤细胞的杀伤效率。结果 CSC-DC的DC免疫表型CD40+、CD80+、CD86+及HLA-DR+的表达均高于单纯DC的相应免疫表型的表达（P<0.01）；DC、CSC-DC与CIK共培养后的DC免疫表型CD40+、CD80+、CD86+及HLA-DR+的表达均高于共培养前（P<0.01）；CSC-DC与CIK共培养后的DC免疫表型CD40+、CD80+、CD86+及HLA-DR+的表达高于DC与CIK共培养后的相应免疫表型（P<0.01）；DC、CSC-DC与CIK共培养后的CIK免疫表型CD3+、CD8+、CD56+的表达高于共培养前（P<0.01）；CSC-DC与CIK共培养后的CIK免疫表型CD3+、CD8+、CD56+的表达高于DC与CIK共培养后的CIK相应免疫表型（P<0.01）；DC、CSC-DC与CIK共培养后的IFN-γ、TNF-α和IL-2分泌水平高于共培养前（P<0.01）；CSC-DC与CIK共培养后的IFN-γ、TNF-α和IL-2分泌水平高于DC与CIK共培养后的相应细胞因子表达（P<0.01）；KSC-DC-CIK组和LSC-DC-CIK组对靶细胞的杀伤率为（50.21±4.24）%和（49.32±3.89）%，明显高于DC-CIK组的（30.25±3.11）%（F=89.157，P<0.01）。结论 CSC抗原负载DC活化CIK （CSC-DC-CIK）对同源肿瘤细胞有更好的杀伤作用，对其作用机制和临床应用的可能性尚需深入研究。