心肌细胞的培养鉴定及β3-AR蛋白提取方法的比较
马苗苗1
胡小芳1
朱晓丽1
王丽1
马依彤2
杨毅宁2
陈邦党2
1.新疆石河子大学医学院第一附属医院心内科 邮编8320082.新疆医科大学第一附属医院心脏中心
摘要：目的：优化培养乳鼠心肌细胞的技术，筛选出简便、准确、特异的提取心肌细胞β3-肾上腺素能受体（β3-AR）膜蛋白的方法。方法使用Ⅱ型胶原酶和差速贴壁法收集心肌细胞，分别用总蛋白法、超速离心法、试剂盒法提取心肌细胞β3-AR膜蛋白；BCA法进行蛋白定量；Western blot法检测蛋白样品中β3-AR和GAPDH相对含量及提取蛋白的特异性。结果优化心肌细胞的培养方法可以使所得细胞产量大、浓度高，满足后续实验。试剂盒法提取蛋白的浓度（8.26±0.29）g/L＞总蛋白法提取法的（5.12±0.47）g/L＞超速离心法的（3.20±0.37）g/L，差异均有统计学意义。Western blot检测结果示，试剂盒提取法所得β3-AR膜蛋白含量（0.22±0.05）＞超速离心法（0.09±0.03）＞总蛋白提取法（0.01±0.01），差异均有统计学意义。结论优化培养心肌细胞的方法可获得高产量、高纯度的细胞。试剂盒提取法可有效提高β3-AR膜蛋白的浓度和特异性。
关键词：受体肾上腺素能β3肌细胞心脏提取法细胞培养技术心肌细胞β3-AR膜蛋白
分类号：R331(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(81260028)石河子大学科学技术研究发展计划(2011ZRKXTD-07)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 599-602 )
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