双重荧光实时PCR法鉴定SRBⅠ基因敲除小鼠
潘丽莉
郑璐
张俊
于洋
姚霜
喻妙梅
冯悦华
罗光华
1.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,2130032.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,2130033.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,2130034.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,2130035.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,2130036.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,2130037.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,2130038.苏州大学附属第三医院综合实验室,常州市个性化诊疗高技术研究重点实验室 邮编,213003
摘要：目的：建立一种双重荧光实时PCR鉴定B族Ⅰ型清道夫受体（SRBⅠ）基因敲除小鼠的方法。方法提取小鼠尾尖DNA，应用自行设计的鉴定野生型和敲除型SRBⅠ基因的引物和探针，经PCR扩增后，在FAM通道及CY5通道判断小鼠基因型。同时应用基因测序技术对结果进行验证，并构建质粒标准品分析该方法的灵敏度和重复性。结果仅在FAM通道出现典型S型扩增曲线的为SRBⅠ基因野生型小鼠，仅在CY5通道出现典型S型扩增曲线的为SRBⅠ基因敲除型小鼠，在两个通道都出现典型S型扩增曲线的为SRBⅠ基因杂合型小鼠。结果与DNA测序法吻合，检测野生型和突变型的灵敏度均达4×101拷贝/μL。结论新方法简单、快速、准确，适用于分型SRBⅠ基因敲除小鼠。
关键词：抗原CD36清道夫受体BⅠ双重荧光实时PCR基因敲除
分类号：R349.82(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81201352)江苏省自然科学基金(BK2012154)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 732-734 )
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