靶向肿瘤坏死因子β小分子抑制剂的筛选及其功能鉴定
孙亚薇
公海艳
曹善楠
刘鹏
朱海燕
耿广锋
许元富
1.中国医学科学院，北京协和医学院血液病医院 血液学研究所，实验血液学国家重点实验室 邮编3000202.中国医学科学院，北京协和医学院血液病医院 血液学研究所，实验血液学国家重点实验室 邮编3000203.中国医学科学院，北京协和医学院血液病医院 血液学研究所，实验血液学国家重点实验室 邮编3000204.中国医学科学院，北京协和医学院血液病医院 血液学研究所，实验血液学国家重点实验室 邮编3000205.中国医学科学院，北京协和医学院血液病医院 血液学研究所，实验血液学国家重点实验室 邮编3000206.中国医学科学院，北京协和医学院血液病医院 血液学研究所，实验血液学国家重点实验室 邮编3000207.中国医学科学院，北京协和医学院血液病医院 血液学研究所，实验血液学国家重点实验室 邮编300020
摘要：目的：通过计算机虚拟筛选和细胞活性筛选，获得能靶向抑制肿瘤坏死因子β（TNFβ）的细胞毒活性的小分子抑制剂。方法根据TNFβ与肿瘤坏死因子Ⅰ型受体（TNFR1）结合的复合晶体结构，采用计算机虚拟筛选方法初步选择对接结果较好的105个小分子化合物（C1~C105），并对其进行细胞活性筛选；MTT法检测小分子化合物抑制TNFβ对L929细胞的细胞毒性；流式细胞术测定小分子化合物对TNFβ引起的细胞凋亡的抑制作用；采用碘化丙啶（PI）单染和流式分析技术检测小分子化合物对L929细胞周期的影响；采用Western blot和双转盘激光共聚焦显微镜分析小分子化合物对TNFβ引起的下游Caspase 3活化的抑制作用。结果 C35能有效抑制TNFβ引起的细胞毒作用，且这种抑制作用呈现剂量依赖性（半数抑制浓度=8.19μmol/L)；C35具有较低的细胞毒性，且对L929细胞周期无影响；C35能阻断TNFβ与其受体结合后引起的细胞凋亡通路，显著抑制TNFβ引起的L929细胞凋亡。结论成功筛选到一个TNFβ小分子抑制剂C35，其能阻断TNFβ引起的细胞凋亡通路，高效抑制TNFβ的细胞毒活性。
关键词：淋巴毒素α受体肿瘤坏死因子Ⅰ型细胞凋亡细胞周期肿瘤坏死因子β小分子抑制剂信号通路
分类号：R730.231(一般性问题)R730.1(一般性问题)
资助基金：国家自然科学基金(31271484)国家自然科学基金(31471116)天津市自然科学基金重点项目(12JCZDJC24600)协和医学院研究生创新基金(100023-0710-1013)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 961-964,1089 )
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