MicroRNA-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响
曹嫚
赵红
何军
戴利
殷小成
姚平波
1.湖南衡阳,南华大学附属南华医院儿科 邮编,4210012.湖南衡阳,南华大学附属南华医院儿科 邮编,4210013.湖南衡阳,南华大学附属南华医院儿科 邮编,4210014.湖南衡阳,南华大学附属南华医院儿科 邮编,4210015.湖南衡阳,南华大学附属南华医院儿科 邮编,4210016.湖南衡阳,南华大学附属南华医院儿科 邮编,421001
摘要:目的:探讨小鼠肺成纤维化细胞模型中microRNA(miR)-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响。方法24只SPF级C57BL/6小鼠随机分为假手术组和肺纤维化模型组,各12只。经气管内注入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型,采用荧光定量PCR检测各组肺组织miR-21的表达。提取小鼠成纤维细胞,胰酶消化,接种于6孔板,使细胞浓度达到30%~50%。设随机对照组、空白对照组和miR-21 mimic组。各组分别在50μL Opti-MEM加入2.5μL PBS、阴性对照储存液和miR-21 mimic储存液(20μmol/L)。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性,蛋白质印迹法检测成纤维细胞含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)和转化生长因子(TGF)-β1的表达。结果与假手术组比较,肺纤维化模型组小鼠肺组织中miR-21的表达量明显上调。与随机对照组和空白对照组比较,miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达显著上调,成纤维细胞增殖率增加,ADAMTS-1蛋白表达明显下降,而TGF-β1表达显著上调;空白对照组与随机对照组ADAMTS-1及TGF-β1蛋白表达无明显差异。结论在小鼠肺成纤维化细胞模型中上调的miR-21可通过ADAMTS-1/TGF-β1信号通路促进肺纤维化。
关键词:肺纤维化成纤维细胞转化生长因子β1微RNAs细胞增殖细胞分化ADAMTS-1microRNA-21
分类号:R563(呼吸系及胸部疾病)
资助基金:湖南省自然科学基金(14JJ7044)湖南省教育厅青年项目(14B156)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1137-1139,1140 )
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