DOI: 10.11958/20150166
SH-SY5Y细胞中过表达RIPK3对ZFP36基因转录的影响
张国禄1
程世翔1
徐忠伟2
衣泰龙1
廖吉连1
涂悦1
张赛1
1.天津市神经创伤与修复重点实验室，武警部队脑创伤与神经疾病研究所，武警后勤学院附属医院脑科医院 邮编3001622.武警后勤学院中心实验室
摘要：目的：探讨SH-SY5Y细胞中受体相互作用蛋白激酶-3（RIPK3）下游信号通路及其中的关键信号分子的作用。方法通过质粒转染的方式在实验组SH-SY5Y细胞内表达外源性RIPK3蛋白，将转染空载质粒载体SH-SY5Y细胞作为对照组。通过观察质粒所携带的绿色荧光蛋白（GFP）在细胞中的表达情况以验证转染结果，Western blot对外源性RIPK3表达进行验证。MTT法检测细胞增殖活性，观察过表达RIPK3对细胞活性的影响，以确认其在细胞内是否具有生物活性。运用转录组测序技术（RNAseq）分别检测2组细胞内基因转录丰度并应用Ingenuity Pathway Analysis（IPA）数据库进行分析，获得RIPK3下游信号通路及关键分子。通过微滴式数字化PCR（ddPCR）对部分RNAseq结果进行验证。结果外源性RIPK3在细胞内具有生物活性，能够抑制SH-SY5Y细胞的增殖。RNAseq数据经IPA分析后得出锌指蛋白36（ZFP36）为RIPK3下游效应分子，其相关效应分子包括血管内皮生长因子（VEGF）、人脱帽酶2（DCP2）、脑源性神经营养因子（BDNF）、肿瘤坏死因子（TNF）的转录丰度也发生了相应的变化。结论 RIPK3能够参与对ZFP36以及与其相关效应分子的转录调控，进而在神经系统的发育、炎症和肿瘤发生等生理、病理过程中发挥重要作用。
关键词：神经母细胞瘤细胞系肿瘤锌指基因表达调控血管内皮生长因子类脑源性神经营养因子肿瘤坏死因子类受体相互作用蛋白激酶-3锌指蛋白36人脱帽酶2
分类号：R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(31200809)武警部队后勤科研项目(WJHQ2012-20)武警后勤学院科研创新团队项目(WHTD201306)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 418-421,422 )
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