RNAi靶向沉默CDX2基因对白血病细胞生物学行为的影响及其作用机制
孙维梅1
李建厂1
贾秀红1
李有杰2
唐慎华1
1.山东滨州,滨州医学院附属医院儿科 邮编,2566032.滨州医学院肿瘤分子生物学重点实验室
摘要:目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)靶向沉默CDX2基因后对白血病细胞K562增殖、凋亡的影响,并检测BCR-ABL及相关凋亡蛋白表达量的变化,探讨其可能的作用机制。方法根据前期实验结果,成功筛选出能够特异性有效靶向沉默CDX2基因的siRNA序列(CDX2-siRNA)和相应的阴性对照序列(CDX2-siRNA-NC),应用罗氏X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent转染K562细胞,流式细胞术检测CDX2沉默表达后对K562细胞凋亡的影响;RT-PCR法和Western Blot法分别检测BCR-ABL、Caspase-9、Bax mRNA和蛋白表达量变化。结果 MTT及流式细胞术检测显示,CDX2沉默表达后,K562细胞增殖能力减弱,凋亡率明显增加;RT-PCR和Western Blot显示,与正常细胞组和CDX2-siRNA-NC组相比,CDX2沉默表达后,CDX2-siRNA组的BCR-ABL mRNA和蛋白表达量明显降低,Caspase-9、Bax mRNA和蛋白表达量明显升高(均P<0.05)。结论 CDX2-siRNA能够明显促进白血病细胞K562凋亡,其机制可能与其抑制BCR-ABL表达,增强Caspase-9、Bax的活性有关。
关键词:白血病RNA干扰基因沉默细胞凋亡融合蛋白质类BCR-ABLCDX2半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9Bax
分类号:R733.7(造血器及淋巴系肿瘤)
资助基金:山东省医药卫生科技发展计划(2014WS0183)山东省自然科学基金(ZR2014HL032)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 679-682,683 )
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天津医药

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北大核心CSTPCD
ISSN:0253-9896
年,卷(期):2016,44(6)
所属栏目:细胞与分子生物学