DOI: 10.11958/20160214
小鼠前脂肪细胞3T3-L1培养与四联诱导分化方法的探讨
孙慧誌1
田德润1
孟洁2
赵楠2
韩洁1
甘椿椿3
王勇2
1.天津医科大学人体解剖与组织胚胎学系 邮编3000702.天津医科大学病理教研室 3000703.天津医科大学药学院 300070
摘要：目的：改进小鼠前脂肪细胞3T3-L1的培养并诱导分化为成熟脂肪细胞的方法。方法使用含有10％胎牛血清（FBS）的高糖型DMEM液体培养基常规培养小鼠前脂肪细胞，2~3 d换液1次。细胞按诱导分化方式的不同分为三联诱导组和四联诱导组。三联诱导组诱导分化培养基Ⅰ成分为常规培养基基础上加用人胰岛素10 mg/L，1-甲基-3-异丁基黄嘌呤（IBMX）0.5 mmol/L，地塞米松（DEX）1.0μmol/L；四联诱导组诱导分化培养基Ⅰ的成分为在三联诱导组基础上加入吲哚美辛0.1 mmol/L。2组均诱导分化培养基Ⅰ培养2 d，连续诱导2次后换用诱导分化培养基Ⅱ，成分为：高糖型DMEM培养基含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 mg/L链霉素混合液，人胰岛素10 mg/L。培养2 d，连续诱导2次。倒置显微镜和油红O染色观察诱导前及诱导后2组细胞的形态变化。结果小鼠前脂肪细胞3T3-L1状态良好，呈现铺路石状生长，均匀布满培养瓶底，2 d传代1次。四联诱导组诱导分化结果优于三联诱导组。三联诱导剂诱导前脂肪细胞后，细胞形态并未发生明显变化。四联诱导剂诱导前脂肪细胞后，可达到90％以上的成熟脂肪细胞。成熟的脂肪细胞呈圆形，有大量脂滴聚集，油红O染色显现橘红色。结论在三联诱导基础上加入吲哚美辛的四联诱导法可以更好地促进脂肪前体细胞分化。
关键词：脂细胞体外研究细胞培养技术3T3-L1细胞
分类号：R329.24(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(81270927)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 993-995 )
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