DOI: 10.11958/20161302
可溶性GST-CRH蛋白原核表达条件的优化及纯化
郁硕1
陈锋2
刘英富3
霍景瑞2
李光宗2
张益2
丁辉2
樊毫军1
1.河南新乡医学院附属医院呼吸内科 邮编4530002.武警后勤学院附属医院救援医学研究所3.武警后勤学院细胞生物学教研室
摘要：目的：通过谷胱甘肽巯基转移酶（GST）-促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）原核表达条件的优化及纯化，获得可溶性好、纯度高的重组GST-CRH蛋白。方法通过对GST-CRH转化菌表达温度、菌液密度（OD600）、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度以及诱导时间的摸索，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测可溶性GST-CRH蛋白的表达情况，GST琼脂糖凝胶进行GST-CRH的纯化，Western Blot对表达的目的蛋白进一步鉴定。结果起始OD6000.8、IPTG工作浓度0.1 mmol/L、30℃诱导8 h为GST-CRH最优诱导条件；融合蛋白经Western Blot鉴定为表达的GST-CRH，纯化后纯度＞95%。结论建立了GST-CRH的原核表达及纯化方法，获得了高纯度的GST-CRH可溶性蛋白。
关键词：促肾上腺皮质素释放激素谷胱甘肽巯基转移酶原核表达纯化
分类号：R392-33(医学免疫学)
资助基金：天津市科技计划(14ZCDZSY00033)国家重点实验室开放基金(JY1402)武警后勤学院附属医院科研平台开放基金(WYFKFM201602)武警后勤学院附属医院科研平台开放基金(WYKFZ201603)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 146-150 )
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