DOI: 10.11958/20170284
抗IL-4R单链抗体原核表达载体的构建与表达
杨光勇
刘茜明
刘莉莉
王文佳
何光志
1.贵阳中医学院基础医学院 5500022.贵阳中医学院基础医学院 5500023.贵阳中医学院基础医学院 5500024.贵阳中医学院基础医学院 5500025.贵阳中医学院基础医学院 550002
摘要：目的 通过BL21(DE3)原核表达系统制备抗白细胞介素-4受体(IL-4R)鼠抗人单链抗体(scFv).方法在前期研究结果的基础上优化抗IL-4R scFv序列,优化后分析scFv序列,构建重组质粒pET-32a-scFv,将该重组质粒酶切鉴定,将其转入BL21(DE3)原核表达菌进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析检测,对表达蛋白进行纯化和复性,通过SDS-PAGE分析抗IL-4R单链抗体的分子质量,运用Western blot检测融合蛋白的特异性.结果插入pET-32a载体的scFv序列长度761 bp,抗IL-4R单链抗体的分子质量在45 ku左右,重组蛋白具有较高的特异性.结论本实验成功构建pET32a-scFv原核表达系统,重组蛋白具有较高的免疫反应性,为进一步研究抗IL-4R单链抗体作为药物靶点提供了工作基础.
关键词：受体白细胞介素4重组蛋白质类电泳聚丙烯酰氨凝胶单链抗体原核表达
分类号：R34(基础医学)
资助基金：贵州省教育厅创新群体重大研究项目(黔教合KY字2016036)2011年贵州省社会发展科技攻关项目(黔科合SY字(2011)3020)贵州省委组织部高层次人才科研条件特助经费(TZJF-2011年28号)贵州省高等学校工程研究中心项目(黔教合KY字20153377)2012年贵州省科学技术基金(黔科合[2012]2075号)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 897-901 )
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