DOI: 10.11958/20170729
趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在肝癌侵袭转移中的作用及机制
张引
余力信
张发鹏
余晓雯
王文龙
罗志强
1.南昌大学第二附属医院肝胆外科,3300002.南昌大学第二附属医院肝胆外科,3300003.南昌大学第二附属医院肝胆外科,3300004.南昌大学第二附属医院肝胆外科,3300005.南昌大学第二附属医院肝胆外科,3300006.南昌大学第二附属医院肝胆外科,330000
摘要：目的 探讨趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12(CXCL12/CXCR4)在原发性肝癌侵袭转移中的作用及机制.方法 分别采用Western blot、免疫组化和Real-time PCR等方法检测60例肝癌及对应癌旁组织标本中CXCL12/CXCR4蛋白及mRNA表达水平.常规培养4种肝癌细胞(Huh7、MHCC97h、HepG2、Hep3B)和正常肝细胞(7702),Real-time PCR检测上述细胞中CXCL12、CXCR4 mRNA的表达,筛选合适的实验细胞.将CXCR4干扰质粒(sh-CXCR4)和对应空载体(sh-control)分别转染至MHCC97h构建稳转细胞系.Transwell侵袭实验、细胞划痕实验、MTT实验分别检测2组细胞的侵袭、迁移和增殖能力.取稳定表达的sh-control和sh-CXCR4 MHCC97h细胞,接种至6只裸鼠皮下,观察瘤体生长情况.Western blot检测sh-control和sh-CXCR4 MHCC97h细胞及对应裸鼠移植瘤中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达,同时对转染CXCR过表达质粒的MHCC97h中VEGF-C的表达水平进行检测.结果 (1)Western blot、免疫组化和Real-time PCR的结果均证实肝癌组织中CXCL12/CXCR4蛋白及mRNA表达水平均高于癌旁组织.(2)Huh7、MHCC97h、HepG2、Hep3B细胞中CXCL12/CXCR4 mRNA表达水平均高于7702细胞,选取MHCC97h为实验细胞.转染sh-CXCR4的MHCC97h细胞的侵袭、迁移和增殖能力均明显低于sh-control组,同时接种含sh-CXCR4的MHCC97h细胞的裸鼠移植瘤的生长速度也明显小于sh-control组.(3)体外和体内实验均证实sh-CXCR4组的VEGF-C表达水平均低于sh-control组,而过表达CXCR4后,VEGF-C的蛋白表达明显上调.结论 CXCL12/CXCR4在原发性癌组织和肝癌细胞中呈现高表达,CXCL12/CXCR4可能通过调控VEGF-C蛋白表达从而抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移.
关键词：肝肿瘤趋化因子CXCL12受体CXCR4肿瘤细胞培养的细胞增殖动物实验血管内皮生长因子受体
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：江西省自然科学基金(20132BAB205045)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 20-26 )
英文信息