慢病毒介导的microRNA-155过表达对肝癌细胞HepG2增殖的影响
牛连杰1
张雅敏2
武兆国1
1.天津医科大学一中心临床学院 3000702.天津市第一中心医院肝胆外科
摘要:目的 通过构建慢病毒(LV)介导的miRNA-155(miR-155)过表达载体,探讨上调miR-155对肝癌细胞系HepG2增殖的影响.方法 针对目标序列合成特异性miR-155过表达片段并克隆入慢病毒载体pGCSHL-GFP,将重组miR-155-hRNA-LV和阴性对照空病毒载体转染HepG2细胞,建立稳定过表达miR-155的细胞系.细胞设过表达组(H组)、阴性对照组(negative control,NC组)和正常组(normal,N组).实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测各组miR-155和PTEN的表达水平;Western blot检测各组PTEN、CyclinD1、CyclinA1+A2蛋白表达情况;细胞增殖-毒性检测(CCK-8)细胞增殖情况.结果 H组miR-155表达量明显高于其NC组及N组,靶基因PTEN的表达量低于NC组及N组(均P<0.05).H组PTEN蛋白的表达量明显低于NC组和N组,而CyclinD1、CyclingA1+A2蛋白的表达量明显高于NC组和N组(均P<0.05).CCK-8结果显示3组12 h时吸光度值开始出现差异,24 h、48 h、72 h H组吸光度值均明显大于NC组和N组(P<0.05),但后2组差异无统计学意义.结论 过表达miR-155可促进肝癌细胞系HepG2细胞增殖.
关键词:肝肿瘤肝细胞微RNAs慢病毒感染microRNA-155
分类号:R735.7(消化系肿瘤)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1151-1154 )
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天津医药

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ISSN:0253-9896
年,卷(期):2018,46(11)
所属栏目:细胞与分子生物学