DOI: 10.11958/20182153
PDCD4表达下调通过pAKT/pGSK3β途径促进胃癌顺铂耐药的机制初探
柳丹1
汤志明1
武福云1
赵红艳1
柯镜1
向鹏2
金佳晴3
李珊4
1.湖北医药学院基础医学研究所 4420002.射阳县人民医院骨科3.武汉市第八医院检验科4.湖北医药学院基础医学研究所 442000;湖北医药学院附属东风医院综合医疗科
摘要：目的 探讨程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)表达下调在顺铂诱导胃癌细胞凋亡中的作用机制,为胃癌的顺铂耐药提供新的分子靶点.方法 通过在人胃癌细胞系SGC7901中敲减表达PDCD4基因,顺铂诱导细胞凋亡,将细胞分为shNC组、shPDCD4组、shNC加药组和shPDCD4加药组,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测PDCD4 mRNA表达水平;Caspase-3活性测定试剂盒、Hoechst染色结合细胞免疫荧光检测细胞凋亡水平;Western blot检测磷酸化蛋白激酶B (pAKT)和磷酸化糖原合成酶激酶3β(pGSK3β)蛋白表达水平.在细胞中加入特异性Akt抑制剂,将细胞分为shNC加药组、shPDCD4加药组、LY294002阻断组(转染shPDCD4质粒,先加LY294002再加入顺铂处理)和Wortmannin阻断组(转染shPDCD4质粒,先加Wortmannin再加入顺铂处理),Western blot检测聚ADP-核糖聚合酶(PARP)蛋白表达水平.结果 qRT-PCR和Western blot检测结果证实稳定转染ShPDCD4质粒的SGC7901细胞中PDCD4的mRNA表达和蛋白表达均有显著下降,体外稳定转染ShPDCD4的SGC7901胃癌细胞株构建成功.相较于shNC加药组,shPDCD4加药组Caspase3活性下降,细胞凋亡降低(P＜0.05).PDCD4表达下调将导致pAKT和pGSK3β的表达水平提高(P＜0.05),应用Akt抑制剂(LY294002、Wortmannin)阻断该信号通路后,PARP的相对表达水平重新上调(P＜0.05).结论 PDCD4表达下调能够通过pAKT/pGSK3β途径降低顺铂引起的胃癌细胞凋亡,进而促进细胞顺铂耐药的形成.
关键词：顺铂抗药性肿瘤胃肿瘤程序性细胞凋亡因子4蛋白激酶B糖原合成酶激酶3β
分类号：R735.2(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81502637)国家自然科学基金(81702639)国家自然科学基金(2018CFB467,2015CFB240)湖北省卫生计生委科研项目(WJ2019M052)湖北省卫生计生委科研项目(WJ2019F065)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 454-458 )
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