DOI: 10.11958/20181959
慢病毒介导CK18基因沉默对人乳腺癌BT549细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响
张青1
黄钱1
张春燕1
刘晓燕2
曾凡才1
甘淋1
1.西南医科大学生物化学与分子生物学教研室 6460002.医学基础研究中心
摘要：目的 检测靶向沉默细胞角蛋白18(CK18)基因对人乳腺癌BT549细胞增殖、凋亡、侵袭运动的影响,并探讨其潜在的分子机制.方法 建立CK18稳定沉默的BT549细胞株,分为3组,以CK18(CK18-sh21、CK18-sh22、CK18-sh23及CK18-sh24)靶向沉默的细胞为实验组CK18-shRNA,加入空载体的为阴性对照(sh-Con)组,未处理为空白对照(Wt)组.采用蛋白印迹法(Western blot)对细胞系进行CK18表达鉴定.采用CCK-8法、平板克隆形成法检测CK18表达缺失对细胞增殖能力的影响;通过流式细胞技术(PE-Annexin V双染法)检测CK18基因沉默后对BT549细胞凋亡的影响;通过PI-FACS法检测沉默CK18对BT549细胞周期的影响;采用划痕试验、Transwell法检测CK18沉默对细胞运动及侵袭能力的影响;采用Western blot检测与侵袭转移相关的分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达情况.结果 建立了CK18沉默的BT549细胞系,CK18的表达被显著抑制,CK18-sh23组相对sh-Con组抑制率最高,可达73％.与Wt组、sh-Con组相比,CK18-shRNA细胞增殖能力在24 h、48 h和72 h降低,克隆形成能力下降,细胞运动、侵袭能力下降,细胞凋亡率和G2期细胞比例均增加(P＜0.05).与sh-Con组和Wt组比较,CK18表达降低能促进E-cadherin表达,抑制vimentin表达(P＜0.05).结论 CK18基因沉默能有效抑制人乳腺癌BT549细胞的增殖、运动、侵袭,诱导细胞的凋亡,并阻滞细胞周期;CK18还可能通过诱导EMT发生参与乳腺癌BT549细胞的侵袭转移过程.
关键词：角蛋白18乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：四川省科技厅应用基础研究项目(14JC0155)泸州-西南医大联合项目(2017LZXNYD-J11)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 463-467,后插2 )
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