DOI: 10.11958/20181907
靶向沉默TrkB基因对结肠癌细胞SW620失巢凋亡水平的影响
祁麟1
齐春胜1
肖波2
1.中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所 3000202.天津医科大学基础医学院免疫学系
摘要：目的 在结肠癌细胞SW620中靶向沉默神经营养因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)基因以探讨其对肿瘤细胞的失巢凋亡水平的影响.方法 构建TrkB慢病毒干扰载体,使用TrkB-shRNA慢病毒感染SW620细胞,利用实时定量PCR和Western blot法分别检测TrkB基因在mRNA和蛋白水平表达量的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测下调TrkB基因表达后贴壁和悬浮生长状态下细胞失巢凋亡率的变化.结果 成功构建TrkB-shRNA慢病毒干扰载体,获得SW620-iTrkB稳定感染细胞系.与SW620-iLuc对照组相比,转染SW620-iTrkB细胞中TrkB基因的mRNA和蛋白相对表达水平均降低(P<0.05).不同生长状态和不同转染质粒转染均对SW620-iTrkB细胞的失巢凋亡水平有影响,存在交互效应(P<0.05).与贴壁状态相比,悬浮状态下SW620-iLuc组和SW620-iTrkB组细胞凋亡率均明显上升(P<0.05);在悬浮状态下,SW620-iTrkB组细胞凋亡率明显高于SW620-iLuc组(P<0.05).结论 慢病毒载体介导的TrkB-shRNA能在结肠癌细胞SW620中产生特异性的基因沉默效应,显著增加细胞的失巢凋亡水平.
关键词：受体蛋白质酪氨酸激酶类失巢凋亡基因沉默肿瘤转移shRNA
分类号：R735.3(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81472681)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 561-565 )
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