DOI: 10.11958/20181966
Shh通路介导损伤后反应性星形胶质细胞获得干细胞潜能
许子宁1
李晓红2
叶益超2
刘晓银3
涂悦2
1.天津中医药大学研究生院 301617;中国人民武装警察部队特色医学中心,天津市神经创伤修复重点实验室2.中国人民武装警察部队特色医学中心,天津市神经创伤修复重点实验室3.中国人民武装警察部队特色医学中心,天津市神经创伤修复重点实验室;天津医科大学研究生院
摘要：目的 探讨Shh信号通路对大脑皮质反应性星形胶质细胞(RAS)获得神经干细胞潜能的影响.方法 体外原代培养SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,以肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1α和C1q三种因子诱导炎症型RAS,划痕实验制备创伤型RAS,使用免疫荧光染色法观察细胞形态及纯度.实验分为普通星形胶质细胞组(对照组)、炎症组、划痕组(创伤组).炎症组培养至干预后24 h,对照组和划痕组培养至第5天进行免疫荧光染色观察巢蛋白(Nestin)阳性细胞,运用Western blot技术检测不同损伤模型的细胞中Shh蛋白的表达量.之后各组细胞培养至第7天更换神经干细胞培养基,将前述3组各自再分为激活组(各组细胞更换神经干细胞培养基后添加Shh激活剂SAG)和抑制组(各组细胞更换神经干细胞培养基后添加Shh抑制剂环巴胺)两个亚组,培养14 d后采用qRT-PCR检测各亚组RAS源性神经干细胞相关基因的表达量.结果 细胞损伤模型中,免疫荧光染色证明各组细胞中划痕组Nestin阳性细胞明显多于炎症组和对照组.Western blot结果显示2组损伤细胞中划痕组Shh蛋白表达量高于炎症组(P<0.05).更换神经干细胞培养基后,激活组中2组损伤细胞的干细胞相关基因Nestin、Pax-6、Sox-2、Oct-4和Map-2的表达水平均有所升高,其中由划痕诱导的RAS神经干细胞相关基因Nestin、Pax-6、Sox-2、Oct-4和Map-2的表达水平高于炎症诱导的RAS神经干细胞和普通星形胶质细胞(P<0.01);添加Shh抑制剂后,3组上述基因表达量皆明显降低,但划痕组的表达量仍高于其他2组(P<0.01).结论 在体外,Shh信号通路可以介导损伤后大脑皮质RAS获得干细胞潜能.
关键词：星形细胞基因反应性星形胶质细胞ShhSAG环巴胺神经干细胞
分类号：R349.6(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81771350)国家自然科学基金(81771352)国家自然科学基金(81671222)天津市自然科学基金(18JCJQJC48500)天津市自然科学基金(15ZXLCSY00040-7)天津市自然科学基金(16JCYBJC27600)天津市自然科学基金(16ZXHLSY00120)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 678-682,封2 )
英文信息