DOI: 10.11958/20190402
基于纳米抗体CDR3区抗原表位展示的β-HCG抗体制备及鉴定
王蕾1
霍景瑞2
张国安2
贾力2
田毅1
杨晓晖2
张晶晶1
刘颖1
吴楠2
刘英富3
1.沧州医学高等专科学校病原生物与免疫学教研室 0610012.沧州医学高等专科学校科技实验中心 0610013.沧州医学高等专科学校科技实验中心 061001;沧州市纳米抗体技术创新中心
摘要：目的 通过纳米抗体CDR3区展示β-HCG C端表位的方式,验证纳米抗体在抗原表位展示中的作用.方法 采用基因合成的方法,将β-HCG C端表位(氨基序列151～165)插入到纳米抗体CDR3区,酶切、连接原核表达载体pET24a,IPTG诱导表达.将His标签填料纯化得到的高纯度目的蛋白免疫新西兰大耳白兔,经5次免疫后,间接ELISA检测效价,抗原偶联纯化介质进行免疫多抗纯化,Western blot进行多抗特异性检测.结果 成功构建原核表达重组载体,并获得高表达菌株,IPTG诱导后,目的蛋白主要以包涵体的形式存在,亲和层析获得纯度大于98％的目的蛋白,包涵体经复性后免疫,效价可达1:512000,Western blot特异性检测显示免疫多抗能够特异性结合β-HCG.结论 纳米抗体CDR3区β-HCG抗原C端表位展示的方法,可用于抗β-HCG抗体的制备,并为今后纳米抗体表位展示相关研究奠定基础.
关键词：抗体绒毛膜促性腺激素表位纳米抗体抗体制备
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(11672332)国家自然科学基金(81772018)天津市自然科学基金(17JCZDJC35400)沧州市科学技术研究与发展指导计划(162302146)沧州市科学技术研究与发展指导计划(162302158)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 785-789 )
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