DOI: 10.11958/20190638
HOTAIR上调miR-152靶向调控HLA-G的生物信息作用预测与验证
李晓娟1
周芝熠1
王珏2
钱源3
1.昆明医科大学第一附属医院产科 6500322.医学检验科产前诊断室3.医学检验科产前诊断室;云南省内设研究机构实验诊断研究所;云南省检验医学重点实验室
摘要：目的 预测并验证HOX转录反义RNA(HOTAIR)通过上调miR-152-3p对人类白细胞抗原-G(HLA-G)靶向调控作用.方法 利用生物信息学网站及软件预测miR-152-3p与HOTAIR和HLA-G基因3'非翻译区(UTR)的结合位点,设计合成含有与miR-152-3p结合位点的HOTAIR和HLA-G基因3'-UTR序列及其突变序列,并构建HOTAIR和HLA-G野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体.经双酶切电泳和测序鉴定后,HOTAIR和HLA-G野生型与突变型双荧光素酶报告基因载体分别与miR-152-3p模拟物(mimics)和miRNA无义序列阴性对照(mimics NC)共转染HTR-8/SVneo细胞,检测荧光素酶活性,观察miR-152-3p对HOTAIR和HLA-G表达的影响.结果 双酶切电泳和测序结果显示,野生型和突变型的HOTAIR和HLA-G基因载体片段大小、序列与实验预期一致,载体构建成功.转染miR-152-3p mimics后的HOTAIR及HLA-G野生型荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而对突变型HOTAIR和HLA-G载体的荧光素酶表达无明显抑制作用(P>0.05).结论 HOTAIR通过上调miRNA-152-3p靶向调控HLA-G.
关键词：HLA-G抗原基因报告HOTAIRmiR-152-3pHTR-8/SVneo双荧光素酶报告基因
分类号：R318.04(医用一般科学)
资助基金：昆明医科大学研究生创新基金(2018S098)云南省高层次卫生技术人才培养项目(H-201628)云南省教育厅科研项目(2016ZZX090)国家自然科学基金(81760273)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1014-1019 )
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