CDK5介导的PPARγ磷酸化在动脉粥样硬化泡沫细胞形成过程中的作用
沈娜1
贺晶2
邸研博3
刘勇2
田凤石2
刘运德4
1.天津医科大学医学检验学院 300203;天津市第四中心医院中心实验室2.天津市第四中心医院心血管内科3.天津市第四中心医院中心实验室4.天津医科大学医学检验学院 300203
摘要:目的 探讨细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)介导的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)磷酸化在动脉粥样硬化中的作用.方法 常规培养小鼠Raw264.7巨噬细胞,实验设对照组(C组)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组(O组,50 mg/L ox-LDL)、Roscovitine+ox-LDL组(R组,15μmol/L Roscovitine+50 mg/L ox-LDL).待细胞融合至70%左右,R组加入15μmol/L Roscovitine预处理30 min,之后O组和R组分别加入50 mg/L ox-LDL继续培养24 h,使其转化为泡沫细胞;C组不作处理.利用Western blot检测各组pPPARγ、tPPARγ、p35和CDK5蛋白表达的变化,油红O染色和异丙醇萃取实验分析各组细胞内脂质聚积情况,酶法测定细胞内胆固醇含量,反转录PCR(RT-PCR)检测各组ox-LDL摄取相关基因CD36、SR-A1和胆固醇外流相关基因ABCA1、ABCG1的mRNA表达水平.结果 ox-LDL诱导后,O组pPPARγ/tPPARγ比值、p35/CDK5比值、细胞内脂质聚积、总胆固醇含量、游离胆固醇含量、胆固醇酯/总胆固醇比值均较C组明显升高(P<0.05);CDK5抑制剂干预后,R组上述指标均较O组降低(P<0.05).RT-PCR结果显示,ox-LDL诱导后,O组ox-LDL摄取相关基因CD36、SR-A1的mRNA表达水平升高,而胆固醇外流相关基因ABCA1、ABCG1的mRNA表达水平降低(P<0.05);CDK5抑制剂干预后,上述指标变化与O组呈相反趋势(P<0.05).结论 CDK5/pPPARγ途径参与动脉粥样硬化泡沫细胞的形成.
关键词:动脉粥样硬化泡沫细胞细胞周期蛋白依赖激酶5过氧化物酶体增殖物激活受体CD36SR-A1ABCA1ABCG1
分类号:R541.4(心脏、血管(循环系)疾病)
资助基金:中国中青年临床研究基金(2017-CCA-VG-021)天津市卫生行业科技攻关计划重点项目(16KG146)国家科技重大专项(17ZXMFSY00200)
论文发表日期:2019-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1045-1049 )
英文信息展开
天津医药

天津医药

北大核心CSTPCD
ISSN:0253-9896
年,卷(期):2019,47(10)
所属栏目:实验研究