DOI: 10.11958/20192340
Wnt信号通路转录上调EGFR促进非小细胞肺癌吉非替尼耐药
王倩
黎谢梦丹
罗凯
郑国沛
张志杰
卢敏莹
董静
贾小婷
贺智敏
1.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100952.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100953.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100954.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100955.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100956.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100957.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100958.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编5100959.广州医科大学附属肿瘤医院,广州医科大学肿瘤研究所 邮编510095
摘要：目的 探讨Wnt信号通路和表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼耐药中的作用及其机制.方法 运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹实验(Western blot)检测EGFR在亲代HCC827细胞与吉非替尼耐药细胞(HCC827/R)中的表达;免疫组化染色检测耐药前后3对NSCLC肿瘤组织中EGFR的表达.双荧光素酶报告基因实验(Luciferase)检测亲代HCC827细胞与耐药HCC827/R细胞Wnt信号通路活化情况;在Jaspar数据库中预测EGFR基因启动子区上TCF/LEF转录因子结合位点;染色质免疫共沉淀实验(Chip)和Luciferase实验检测转录因子对基因表达的调控;功能阻断实验检测Wnt信号通路/EGFR途径介导吉非替尼耐药的作用.结果 与亲代HCC827细胞相比较,HCC827/R细胞的EGFR在mRNA和蛋白水平表达均明显增高(P<0.05).免疫组化染色结果显示在3例吉非替尼耐药前后NSCLC配对肿瘤组织样品中有2例耐药后EGFR表达较耐药前增加.Luciferase实验结果显示,与亲代细胞比较,Wnt/β-catenin信号通路在耐药HCC827/R细胞中异常活化(P<0.05).生物信息学分析预测到EGFR基因启动子区-1476～-1468区域存在Wnt/β-catenin信号通路下游转录因子TCF3/TCF4结合位点,Chip和Luciferase实验证实Wnt/β-catenin信号通路可转录上调EGFR表达.功能阻断实验结果显示当利用Wnt3a刺激亲代HCC827细胞的同时敲低EGFR,吉非替尼对细胞的抑制率较单独利用Wnt3a刺激细胞时的细胞抑制率得到恢复(P<0.05).结论 Wnt/β-catenin信号通路转录上调EGFR促进NSCLC的吉非替尼耐药,其为提高NSCLC吉非替尼靶向治疗效果提供了新的实验依据.
关键词：癌非小细胞肺Wnt信号通路受体表皮生长因子吉非替尼耐药性
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81872450)计划生育科技项目(20181A011093)计划生育科技项目(20191A011099)广东省医学科学技术研究项目(B2019063)
论文发表日期：2020-01-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 8-13 )
英文信息