DOI: 10.11958/20200169
巨噬细胞极化对心肌成纤维细胞活化的影响
吴惠娟1
张盛昔1
杨潇2
胡因铭1
王乐旬1
郭姣1
1.广东省代谢病中西医结合研究中心,广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室,粤港澳联合代谢病重点实验室,广东药科大学中医药研究院 5100062.广州市第一人民医院检验科
摘要：目的 观察巨噬细胞极化上清对心肌成纤维细胞活化的影响.方法 提取SD大鼠的骨髓细胞和心肌成纤维细胞.利用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)处理骨髓细胞后,加入刺激因子:M0(无刺激因子)、M1(100μg/L脂多糖+10μg/L干扰素-γ)、M2(20μg/L白细胞介素-4)诱导巨噬细胞极化.将极化后的不同型别巨噬细胞及其培养上清分别与心肌成纤维细胞共培养,分别设空白对照组、M0组、M1组和M2组,通过细胞免疫荧光检测心肌成纤维细胞中纤维化蛋白的表达水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测巨噬细胞和成纤维细胞特征分子的表达;Western blot检测纤维化相关蛋白及转化生长因子β受体(TGFβR)、血小板衍生生长因子受体(PDGFRs)信号通路活化情况.结果 经M-CSF及相应刺激因子诱导,成功获得M1和M2型巨噬细胞.细胞共培养结果显示,与M0组相比,M1组上清培养的心肌成纤维细胞中胶原蛋白1(Col1a1)和Col3a1的mRNA水平以及平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平显著降低(P<0.05),而M2组上清培养的心肌成纤维细胞中Col1a1和Col3a1的mRNA水平以及α-SMA、结缔组织生长因子(CCN2)表达水平显著升高(P<0.05).M1组上清培养的心肌成纤维细胞中PDGFRβ蛋白磷酸化水平显著低于M0组(P<0.01),而M2组上清培养的心肌成纤维细胞中PDGFRβ蛋白磷酸化水平显著高于M0组(P<0.05).结论 M1型巨噬细胞上清能够抑制心肌成纤维细胞活化,而M2型巨噬细胞上清能够激活心肌成纤维细胞.M1型巨噬细胞抑制纤维化的作用可能与抑制PDGFRβ通路的活化有关.
关键词：纤维化心脏成纤维细胞巨噬细胞受体血小板源生长因子β
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：广东省自然科学基金(2018A030310403)广东省自然科学基金(2018A0303130168)广东省医学科学技术研究项目(A2018068)应用基础研究项目(2020A1515010155)
论文发表日期：2020-07-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 611-615,后插1 )
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