DOI: 10.11958/20200238
不同浓度米诺环素对人胶质瘤细胞增殖、自噬、凋亡的影响及其机制
韩利民1
严婉约2
李巧巧2
李科2
刘丽2
赵海龙1
1.遵义医科大学病理生理学教研室 5630002.遵义医科大学第一临床学院
摘要：目的 探讨不同浓度米诺环素对人类胶质瘤U87和LN229细胞增殖及凋亡的影响和作用机制.方法 (1)U87和LN229细胞设对照组(DMSO处理),5μmol/L米诺环素组和10μmol/L米诺环素组,分组处理72 h后采用MTT法检测细胞增殖水平,免疫荧光标记检测细胞自噬蛋白微管相关蛋白l轻链3B亚基(LC3B)表达水平,Western blot法检测细胞自噬和凋亡相关蛋白的表达变化.(2)构建沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)-shRNA载体,观察敲低SIRT1表达后,不同浓度米诺环素对U87和LN229细胞自噬的影响.结果 (1)与对照组相比,5μmol/L和10μmol/L米诺环素组细胞增殖能力下降,免疫荧光标记显示胞浆内自噬标记蛋白LC3B的表达增多,Western blot结果显示哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)水平显著降低,自噬基因相关蛋白5(Atg5)、磷酸化AMP依赖的蛋白激酶α亚基(p-AMPKα)、SIRT1水平显著增加(P<0.05).与对照组相比,10μmol/L米诺环素组B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶(p-p70s6k)水平显著降低,活化形式的Caspase-3(Cleaved caspase-3)水平显著增加(P<0.05),而5μmol/L米诺环素组除Cleaved Caspase-3表达水平下降外其他凋亡相关蛋白水平未见显著变化(P>0.05).(2)敲低SIRT1表达后,shSIRT1组mTOR和LC3B表达水平较对照组明显下降;而经过米诺环素处理后,mTOR的表达出现明显升高,而LC3B表达水平仅部分恢复.结论 5、10μmol/L的米诺环素均能有效抑制人类胶质瘤U87和LN229细胞的生长,其机制可能与AMPK/SIRT1通路诱导细胞自噬和p70s6k/Bcl-2通路诱导细胞凋亡有关.
关键词：米诺环素神经胶质瘤细胞增殖细胞凋亡自噬AMP活化蛋白激酶类沉默信息调节因子2相关酶1
分类号：R739.41(神经系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(31701007)贵州省教育厅青年科技人才成长项目(2017-198)贵州省大学生创新创业训练计划(201710661042)
论文发表日期：2020-09-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 801-806,后插1 )
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