DOI: 10.11958/20201991
巨噬细胞外泌体通过抑制自噬诱导高血糖对肾小球足细胞的损伤作用
饶超峰1
薛笑楠1
朱明英1
罗富里2
1.鹰潭市人民医院内分泌科 3350002.江西中医药大学附属医院肾病科
摘要：目的 观察高糖(HG)处理的Raw264.7巨噬细胞来源的外泌体(Exos)对足细胞的损伤作用,并探讨其作用机制是否与抑制足细胞自噬相关.方法 将高糖处理Raw264.7细胞的外泌体(HG-Exos)和原代足细胞体外孵育24 h,检测Exos在原代足细胞的内化情况.原代足细胞用HG提取不同剂量的Exos(0、7、14、28、56、112 mg/L)处理,探讨HG-Exos对足细胞存活、自噬的影响.将原代足细胞分为对照组、HG-Exos组、氯喹组、HG-Exos+氯喹组、雷帕霉素组、HG-Exos+雷帕霉素组,探讨HG-Exos诱导的细胞毒性是否会受到自噬调节剂的影响.采用透射电镜观察自噬体生成情况;采用CCK-8法测定Exos对细胞活力的影响.采用Western blot法检测细胞中LC3B、Beclin 1、Nephrin蛋白的表达.结果 与正常葡萄糖处理的Raw264.7细胞相比,HG处理的Raw264.7细胞产生的Exos数量显著增加(P<0.05).在激光共聚焦显微镜下观察到PKH67标记的Exos位于足细胞的核周区中.CCK-8法检测显示,足细胞活力随HG-Exos刺激剂量的增加和时间的延长而降低.与0 mg/L HG-Exos组比较,7 mg/L、14 mg/L和28 mg/L HG-Exos组足细胞中Nephrin、Beclin 1、LC3B蛋白表达水平均明显降低,且含有双层膜结构的自噬小体数量显著减少(P<0.05).雷帕霉素组、HG-Exos+雷帕霉素组Nephrin、Beclin 1、LC3B蛋白表达水平及自噬体数量均明显高于HG-Exos组、氯喹组和HG-Exos+氯喹组(P<0.05).结论 高糖诱导的巨噬细胞Exos可降低足细胞活力以及增加足细胞损伤,其作用机制与降低足细胞自噬有关.
关键词：巨噬细胞外泌体足细胞自噬高糖
分类号：R587.24(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：江西省自然科学基金(20192BAB215051)科技计划(YKZ20190111)
论文发表日期：2021-02-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 119-125 )
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