DOI: 10.11958/20201709
PD-L1过表达在DENV-2诱导血管内皮细胞自噬和凋亡中的作用机制
姚峰
朱磊
程波
杨明
刘敏
江汉大学附属医院,武汉市第六医院综合三科,430015
摘要：目的 探讨PD-L1过表达在Ⅱ型登革病毒(DENV-2)影响血管内皮细胞自噬和凋亡中的作用及机制.方法 以血管内皮细胞EAhy926为研究对象,以含梯度DENV-2(1×108～2×109 pfu/L)的无血清培养基处理细胞24 h和48 h,同时以无血清培养基处理细胞作为对照组,无血清培养基加入空白孔作为调零孔,MTT法检测细胞增殖活力.以PD-L1过表达慢病毒液和空载慢病毒液处理细胞,分别设空载对照组和转染组.DENV-2(1.2×109 pfu/L)处理细胞12、24、48 h作为DENV-212 h组、DENV-224 h组及DENV-248 h组,同时设置对照组(无血清培养基处理);另以DENV-2处理空载对照组和转染组48 h,以蛋白印迹法检测LC3B、Beclin-1及Bcl-2蛋白表达变化,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果 1×108～2×109 pfu/L DENV-2可剂量依赖性抑制EAhy926细胞增殖,DENV-224 h和48 h的半数抑制浓度(IC50)分别是1.8×109 pfu/L和1.2×109 pfu/L.与对照组比较,DENV-212 h组、DENV-224 h组及DENV-248 h组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,细胞总凋亡率增加(均P<0.05).与空载对照组比较,转染组PD-L1蛋白表达上调(P<0.01).DENV-2处理48 h,与空载对照组相比,转染组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,细胞总凋亡率降低(均P<0.01).结论 DENV-2通过上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达及下调Bcl-2蛋白表达,从而诱导EAhy926细胞自噬和凋亡,而过表达PD-L1可抵抗DENV-2的诱导效应.
关键词：登革热病毒内皮细胞自噬细胞凋亡程序性细胞死亡受体-1配体
分类号：R512.82(传染病)
资助基金：卫生部科研项目(WX18C22)卫生部科研项目(WX18D24)卫生部科研项目(WX18D44)
论文发表日期：2021-03-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 231-236 )
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