葛根总皂苷调控NAMPT-Sirt1轴诱导BMSCs向髓核样细胞分化
岳宗进
刘汝银
于露
王新立
冯仲锴
王西彬
河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)脊柱科 450002
摘要:目的 研究葛根总皂苷(TSPL)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的影响及其作用机制.方法 体外建立大鼠腰椎间盘退变模型,分为假手术组、模型组、30 mg/kg TSPL治疗组和50 mg/kg TSPL治疗组.原代培养的BMSCs分为BMSCs组,BMSCs-TSPL(10、20、30、40、50μmol/L)组,BMSCs-TSPL(30μmol/L)-FK866[烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)特异性抑制剂,2.5μmol/L]组,BMSCs-TSPL(30μmol/L)-SRT2104(Sirt1激活剂,10μmol/L)组.二甲基亚甲基蓝比色法检测细胞和组织中糖胺聚糖含量,qPCR和Western blot检测髓核样细胞COL2A1、Aggrecan、Sox9、Tie2以及Sirt1的mRNA和蛋白表达量.WST-8法检测细胞中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腺苷三磷酸(ATP)和NAMPT水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠椎间盘L5~S1组织中糖胺聚糖含量减少(P<0.05);与模型组相比,TSPL治疗组大鼠糖胺聚糖含量增加,且50 mg/kg TSPL效果优于30 mg/kg TSPL(P<0.05);与BMSCs组相比,TSPL单独或联合SRT2104处理增加BMSCs中糖胺聚糖、COL2A1、Aggrecan、Sox9和Sirt1的mRNA和蛋白表达量及NAD+、ATP和NAMPT含量,而降低Tie2的mRNA和蛋白表达量(P<0.05);与BMSCs-TSPL组相比,BMSCs-TSPL-FK866组COL2A1、Aggrecan、Sox9和Sirt1的mRNA和蛋白表达量及糖胺聚糖、NAD+、ATP和NAMPT含量降低,而BMSCs-TSPL-SRT2104组上述指标水平增加(P<0.05).结论 TSPL可通过NAMPT-Sirt1轴诱导大鼠BMSCs向髓核样细胞分化.
关键词:椎间盘退行性变葛根间充质基质细胞烟酰胺磷酸核糖基转移酶葛根总皂苷骨髓间充质干细胞髓核样细胞NAMPT-Sirt1轴
分类号:R961.1(药理学)R681.5(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
论文发表日期:2021-09-15
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 897-904 )
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天津医药

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CSTPCD北大核心
ISSN:0253-9896
年,卷(期):2021,49(9)
所属栏目:细胞与分子生物学