DOI: 10.11958/20203592
OX40Ig修饰大鼠脂肪间充质干细胞的实验研究
黄志伟1
刘涛2
陈晓波3
耿洁1
李光4
王玉亮1
1.天津医科大学第二医院检验科,天津市泌尿外科研究所 3002112.天津市第一中心医院器官移植中心3.优赛生命科技有限公司4.天津医科大学基础医学院遗传学系
摘要:目的 构建含OX40融合蛋白(OX40Ig)基因修饰的大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)即ADSCsOX40Ig,探讨其在体外对淋巴细胞的免疫调节作用.方法 构建pcDNA3.1(+)/OX40Ig融合基因表达载体,采用核转染技术转染大鼠ADSCs,Western blot检测ADSCs中OX40Ig表达水平.ADSCs与大鼠异基因淋巴细胞共培养后分为对照组(反应细胞+刺激细胞)、ADSCs组(反应细胞+刺激细胞+ADSCs)及ADSCsOX40Ig组(反应细胞+刺激细胞+ADSCsOX40Ig),MTT法检测淋巴细胞增殖抑制率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测淋巴细胞内干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-10及转化生长因子(TGF)-βmRNA表达.结果 经测序鉴定验证,pcDNA3.1(+)/OX40Ig质粒构建成功,转染ADSCs后OX40Ig蛋白呈高表达;与ADSCs组比较,ADSCsOX40Ig显著增强异基因淋巴细胞增殖抑制率(P<0.05);对照组、ADSCs组及ADSCsOX40Ig组的IFN-γmRNA相对表达水平依次降低,而IL-10、TGF-βmRNA相对表达水平依次升高(P<0.05).结论 ADSCsOX40Ig较单纯ADSCs能更好地发挥对异基因淋巴细胞的免疫调节作用.
关键词:间充质基质细胞基因融合免疫调节OX40配体脂肪间充质干细胞真核表达载体
分类号:R349.65(基础医学)
资助基金:国家自然科学基金(81470982)国家高技术研究发展计划(863计划)(863;2012AA021003)
论文发表日期:2021-10-15
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1009-1013 )
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