miR-25对食管癌EC109细胞侵袭和迁移能力的影响及临床意义

李卿; 李轶君; 张国锐

doi:10.11958/20211622

摘要：目的探索miR-25对食管癌侵袭和迁移能力的影响以及作为食管癌诊断生物标志物的潜力.方法 (1)荧光定量PCR(qPCR)检测54例早期食管癌患者癌组织和癌旁组织中miR-25表达水平.(2)人食管癌细胞EC109分为miR-25 mimic组、NC mimic组、miR-25 inhibitor组和NC inhibitor组.转染相应序列后,qPCR检测miR-25转染效率.Transwell实验检测过表达或敲低miR-25对EC109细胞侵袭和迁移的影响.Targetscan数据库预测miR-25的靶基因,选定靶基因盐诱导激酶1(SIK1)基因.Western blot和双荧光素酶报告实验鉴定miR-25与SIK1的靶向关系.(3)EC109细胞分为pcDNA 3.1组、SIK1过表达组和miR-25+SIK1过表达组.Transwell实验检测miR-25靶向SIK1对EC109细胞侵袭和迁移能力的影响.(4)提取食管癌患者(54例)和健康对照者(54例)的血浆外泌体,比较2组血浆外泌体中miR-25的相对表达量,分析食管癌患者癌组织和血浆外泌体中miR-25的相关性.结果 (1)食管癌组织中miR-25相对表达水平高于癌旁组织.(2)过表达miR-25后,EC109细胞侵袭和迁移能力增强,而敲低miR-25表达后,细胞侵袭和迁移能力下降.Western blot结果显示,过表达miR-25后,SIK1蛋白表达下降;反之,敲低miR-25后SIK1蛋白表达升高.(3)Transwell实验显示,与pcDNA 3.1组相比,SIK1过表达组EC109细胞侵袭和迁移的细胞数量减少,而miR-25和SIK1联合作用后,EC109侵袭和迁移的细胞数量较SIK1过表达组增多.(4)食管癌血浆外泌体样本中miR-25的表达量高于健康对照,且miR-25在食管癌组织中的表达与血浆外泌体中的相对表达量呈正相关.结论 miR-25可能通过靶向调控SIK1来促进食管癌细胞的侵袭和迁移,且miR-25有作为食管癌早期诊断生物标志物的潜力.