基于钙超载探讨自主神经调控对HFpEF大鼠心肌结构重塑、电重塑及纤维化的影响

彭明; 李玉凯; 王岚; 黄粮; 成忠; 肖杰

doi:10.11958/20220897

摘要：目的探究自主神经调控对大鼠射血分数保留心力衰竭(HFpEF)模型结构重塑、电重塑及纤维化的影响.方法 SPF级12周龄SD大鼠44只,抽取10只作为对照组,余34只用于建立HFpEF模型.通过腹主动脉-下腔静脉瘘结扎的方式构建HFpEF模型.其中30只建模成功,4只死亡.建模成功的大鼠分为模型组、自主神经调控组(调控组)及自主神经调控+乙酰胆碱M2受体拮抗剂组(调控+拮抗组),每组10只.调控组在模型组基础上经皮耳缘迷走神经刺激.调控+拮抗组在调控组基础上每天经尾静脉注射美索曲明(0.5 mg/kg).通过心脏超声仪测量心脏舒张末期左心室后壁厚度(LVPWD-D)、舒张末期室间隔厚度(IVS-D)及二尖瓣舒张早期/舒张晚期血流速度最大峰值(E/A).心脏电生理刺激仪获取心脏的有效不应期(ERP)、单向动作电位时程(MAPD).酶联免疫吸附试验(ELISA)检测B型尿钠肽前体(NT-proBNP)水平.HE染色观察心肌细胞排列及炎性细胞浸润情况.Masson染色观察心肌纤维化程度.RT-PCR和Western blot检测心肌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)及其调节蛋白受磷蛋白(PLB)mRNA及蛋白的表达.结果 HE染色可见模型组心肌细胞排列紊乱,细胞间隙不够明显,伴有炎性细胞浸润.Masson染色可见模型组心肌纤维排列紊乱,大量胶原纤维生成.调控组上述病理改变与模型组比较均明显减轻,而调控+拮抗组与模型组相比无明显改善.与对照组比较,模型组NT-proBNP、LVPWD-D、IVS-D、ERP、MAPD、MMP-9 mRNA及蛋白、PLB mRNA及蛋白表达均升高,E/A、TIMP-1 mRNA及蛋白、SERCA2a mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05).与模型组比较,调控组NT-proBNP、LVPWD-D、IVS-D、ERP、MAPD、MMP-9 mRNA及蛋白、PLB mRNA及蛋白表达均降低,E/A、TIMP-1 mRNA及蛋白、SERCA2a mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05).而调控+拮抗剂组上述指标与模型组比较差异无统计学意义.结论自主神经调控可能通过钙超载途径减轻HFpEF大鼠的结构重塑、电重塑以及心肌纤维化状态,改善HFpEF预后.