DOI: 10.11958/20220707
miR-149-3p在先天性心脏病胎鼠心脏组织中的表达及其对P19细胞分化的影响
胡丹慧1
罗慧臣2
刘海英1
1.南华大学衡阳医学院附属第一医院新生儿科 4210012.南华大学衡阳医学院附属第一医院风湿免疫科 421001
摘要：目的 探讨miR-149-3p在先天性心脏病(CHD)胎鼠心脏组织中的表达及其对小鼠畸胎瘤P19细胞分化的影响.方法 建立CHD室间隔缺损胎鼠模型,于妊娠第19天,HE染色观察心脏组织病理学变化,实时荧光定量PCR(qPCR)检测心脏组织中miR-149-3p和热休克蛋白蛋白家族B成员6(HSPB6)mRNA表达水平.二甲基亚砜(DMSO)诱导P19细胞向心肌细胞分化,并收集分化第0、5、10天的细胞,qPCR检测诱导分化过程中心肌分化标志物GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心房利钠尿多肽(ANP)的mRNA表达水平以及HSPB6 mRNA和miR-149-3p表达水平.miR-149-3p过表达慢病毒和空载慢病毒感染P19细胞,DMSO诱导分化第10天,免疫荧光染色检测细胞中cTnI蛋白表达情况,qPCR检测心肌分化相关标志物mRNA表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-149-3p与HSPB6之间的靶向关系.结果 与正常组比较,CHD组胎鼠出现心脏室间隔缺损,心脏组织中miR-149-3p高表达,而HSPB6低表达(P<0.01).P19细胞在向心肌细胞分化的过程中,GATA4、cTnT、ANP和HSPB6 mRNA水平均逐渐上升,而miR-149-3p表达水平逐渐下降(P<0.05).诱导分化第10天,miR-149-3p过表达可明显降低心肌细胞分化率,并下调GATA4、cTnT、ANP mRNA表达水平(P<0.01).双荧光素酶报告基因实验证实,miR-149-3p可以靶向调控HSPB6表达.结论 miR-149-3p可能通过靶向下调HSPB6抑制P19细胞向心肌细胞分化.
关键词：心脏缺损先天性微RNAsHSP20热休克蛋白质类细胞分化miR-149-3pP19细胞
分类号：R541.1(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：湖南省卫生健康委科研立项课题(202106010111)
论文发表日期：2023-01-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 45-49 )
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