梓醇对IL-1β诱导软骨细胞损伤的保护机制研究

马玲; 钟利国; 崔裕如; 刘彬

doi:10.11958/20221441

摘要：目的探讨梓醇对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞损伤的影响及其可能作用机制.方法分离培养人膝关节软骨细胞,分为对照(Con)组、IL-1β组(用10μg/L IL-1β处理48 h),IL-1β+梓醇-低组、IL-1β+梓醇-中组、IL-1β+梓醇-高组(分别用10、20及50 ng/L的梓醇处理软骨细胞后,用10μg/L IL-1β处理24 h),IL-1β+miR-NC组、IL-1β+miR-140-5p组(分别转染miR-NC和miR-140-5p mimics后,用10μg/L IL-1β处理24 h),IL-1β+梓醇+anti-miR-NC组、IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p组(分别转染anti-miR-NC和anti-miR-140-5p后,用50 ng/L梓醇和10μg/L IL-1β处理24h).细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平;流式细胞术检测细胞凋亡;采用实时荧光定量PCR检测miR-140-5p的表达水平;Western blot检测活化的胱天蛋白酶3(Cleaved-caspase 3)、Cleaved-caspase 9蛋白表达.结果与IL-1β组比较,IL-1β+梓醇-低组、IL-1β+梓醇-中组、IL-1β+梓醇-高组IL-6、TNF-α、IFN-γ水平,细胞凋亡率和Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白表达水平降低(P＜0.05),细胞活力和miR-140-5p表达水平升高(P＜0.05);与IL-1β+miR-NC组比较,IL-1β+miR-140-5p组IL-6、TNF-α、IFN-γ水平,细胞凋亡率和Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白表达水平降低(P＜0.05),细胞活力和miR-140-5p表达水平升高(P＜0.05);与IL-1β+梓醇+anti-miR-NC组比较,IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p组IL-6、TNF-α、IFN-γ水平,细胞凋亡率和Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白表达水平升高(P＜0.05),细胞活力和miR-140-5p表达水平降低(P＜0.05).结论梓醇可能通过上调miR-140-5p表达,抑制细胞炎性因子释放及细胞凋亡,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤.